Peptides vasoactifs endogènes dans la prolifération accrue des cellules musculaires lisses vasculaires de rats spontanément hypertendus: rôle des facteurs de croissance

Abstract

Contribuant à la pathophysiologie des maladies vasculaires comme dans le cas de l’hypertension, le remodelage vasculaire est associé à une altération de la croissance des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV) (prolifération, taille, etc.). Or la prolifération des CMLV est augmentée par les peptides vasoactifs tels que l’angiotensine II (AngII) et l’endothéline-1 (ET-1). Ces peptides étant surexprimés lors de l’hypertension, cette étude fut entreprise pour déterminer leur contribution endogène ainsi que celles du facteur de croissance épidermique (EGF), du facteur de croissance insulinique (IGF-1) et du facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF) à la prolifération accrue des CMLV et aux mécanismes sous-jacents. Des CMLV A-10 et des CMLV de rats WKY et SHR âgés de 12 semaines ont été utilisées pour cette étude. La prolifération cellulaire fut déterminée par incorporation de [3H]thymidine. La phosphorylation de ERK 1/2 et du récepteur de EGF fut déterminée par immunobuvardage. Les CMLV de SHR, comparées à celles de WKY, ont montré une prolifération accrue qui fut atténuée par le losartan, un antagoniste du récepteur AT1 de l’AngII et par le BQ-123 et le BQ-788, antagonistes des récepteurs ETA et ETB de l’ET-1. La prolifération accrue des CMLV de SHR fut ramenée à celle des WKY par les inhibiteurs des récepteurs au PDGF (AG-1295), au IGF-1 (AG-1024) et au EGF (AG-1478). La phosphorylation du récepteur au EGF, accrue dans les CMLV de rats SHR comparée à celle des WKY, fut atténuée par le losartan, le BQ-123, le BQ-788 et l’AG-1478, mais ne fut pas atténuée par l’AG-1295 et l’AG-1024. De plus, la phosphorylation accrue de ERK 1/2 dans les CMLV de rats SHR fut atténuée par le losartan, le BQ-123, le BQ-788 et les inhibiteurs des récepteurs aux facteurs de croissance. Parallèlement, le rôle de la transactivation de EGF-R dans la prolifération accrue induite par AngII et ET-1 fut aussi examiné dans les CMLV A-10. L’augmentation, induite par AngII et ET-1, de la prolifération et de la phosphorylation de ERK 1/2 dans les CMLV A-10 fut ramenée au niveau contrôle par AG-1478. Ces données suggèrent que les peptides vasoactifs endogènes induisent la prolifération accrue des CMLV par la signalisation des MAP kinases résultant de la transactivation de EGF-R.

Vascular remodelling that contributes to the pathophysiology of vascular diseases, including hypertension, is associated with alteration in vascular smooth muscle cell (VSMC) growth, hypertrophy, etc. We have recently shown that vasoactive peptides such as angiotensin II (AngII) and endothelin-1 (ET-1) increased the proliferation of VSMC. Since the levels of AngII, ET-1 and growth factors are increased in hypertension, the present studies were undertaken to examine if these endogenous vasoactive peptides and growth factors contribute to the enhanced proliferation of VSMC in spontaneously hypertensive rats (SHR) and to further investigate the underlying mechanisms responsible for enhanced proliferation. A10 VSMC and aortic VSMC from 12 week old SHR and age-matched WKY rats were used for these studies. Cell proliferation was determined by [3H]thymidine incorporation and ERK ½ and growth factor receptor phosphorylation was determined by Western blotting. VSMC from SHR exhibited enhanced cell proliferation as compared to WKY as determined by enhanced [3H]thymidine incorporation which was attenuated by AngII AT1 receptor antagonist losartan, as well as by endothelin receptor ETA and ETB antagonists BQ-123 and BQ-788, respectively. The inhibitors of platelet derived growth factor receptor (PDGF-R); AG-1295, epidermal growth factor receptor (EGF-R); AG-1478, and insulin-like growth factor receptor (IGF-R); AG-1024 also attenuated the enhanced proliferation of VSMC from SHR to WKY control levels. In addition, VSMC from SHR exhibited enhanced phosphorylation of EGF-R as compared to WKY, which was attenuated by losartan, BQ-123, BQ-788 and AG-1478, and not by AG-1295 and AG-1024. Furthermore, the enhanced phosphorylation of ERK ½ in VSMC from SHR was also attenuated by losartan, BQ-123 and BQ-788 as well as by growth factor receptor inhibitors, AG-1478, AG-1024 and AG-1295. The implication of growth factor receptor transactivation in AngII and ET-1 induced enhanced cell proliferation was also examined in A10 VSMC. Ang II or ET-1 induced enhanced proliferation of A-10 VSMC and enhanced ERK ½ phosphorylation was also restored to control levels by EGF-R inhibitor. These data suggest that vasoactive peptide-induced growth factor receptor transactivation through MAP kinase signaling may contribute to the enhanced proliferation of VSMC from SHR.