Travaux préalables à l’investigation fonctionnelle de la cholestérol-25-hydroxylase (CH25H)

Abstract

La sénescence cellulaire demeure à ce jour un phénomène fort méconnu, mais jouerait un rôle crucial dans le développement de nombreuses pathologies telles que la dégénérescence maculaire reliée à l’âge, la maladie d’Alzheimer et le cancer. De plus, dans le cadre de travaux antérieurs, il a été démontré que la cholestérol-25-hydroxylase (CH25H) est l’un des principaux marqueurs métaboliques étant amplifiés lors du passage de la cellule d’un état prolifératif à celui de la sénescence. Or, les partenaires métaboliques de la CH25H sont également méconnus. Les présents travaux s’inscrivent donc dans l’objectif de la compréhension du rôle que joue la CH25H dans le phénomène de la sénescence cellulaire et du développement d’avenues thérapeutiques impliquant son inhibition. Dans ce contexte, le document suivant rapporte la synthèse de cholestérol et de 25-hydroxycholestérol (25HC), produit de l’action de la CH25H, fonctionnalisés en position C6 par un motif biotine. Ces composés ayant conservé leur activité quant à l’induction (ou non) de la sénescence, ils devraient s’avérer forts utiles lors de la réalisation d’un essai par immunoprécipitation. Ensuite, il fait également état du développement computationnel de cinq candidats à l’inhibition compétitive de la CH25H.

To this day, cellular senescence remains a phenomenon that is poorly understood and yet still plays a key role in the development of pathologies such as age-related macular degeneration, Alzheimer’s disease and cancer. In addition, it has been reported that cholesterol-25-hydroxylase (CH25H) is one of the most upregulated metabolic markers when cells transition from a proliferative state to a senescent state. However, the metabolic partners of CH25H are also unknown. This work therefore aims to facilitate the understanding of the role played by CH25H in cellular senescence and the development of therapeutic avenues involving its inhibition. With this in mind, we hereby report the synthesis of cholesterol and 25-hydroxycholesterol (25HC), the product of CH25H’s action, functionalized by a biotin motif at position C6. These compounds, which have retained their activity with respect to the induction (or not) or senescence, should prove especially useful when used in a pull-down assay. We also report the computational development of 5 potential competitive inhibitors of CH25H.