Impact des changements de solution et/ou température de reperfusion sur l'homéostasie du Ca2+ cytosolique dans les cellules sinusoïdales endothéliales préservées à froid

Abstract

Les cellules endothéliales sinusoïdales (CES) sont très sensibles aux dommages induits par la préservation hypothermique. Elles peuvent alors exprimer, suite à une augmentation de leur Ca2+, des molécules d'adhésion perturbant la microcirculation et engendrant des dysfonctions primaires des greffons. Le présent travail a pour but l'étude des effets des changements de composition/température des solutions de reperfusion sur le Ca2+ dans les CES isolées de rat. Les cellules ont été préservées à froid dans la solution de l'Université du Wisconsin (UW) puis réchauffées et reperfusées dans le tampon physiologique HEPES ou dans le UW à 20 ou 37°C. Les changements de température et de solution ou seulement de solution ont induit, chez les CES préservées ou non, une importante augmentation transitoire du Ca2+. Le changement de la température seulement dans le UW ou l'HEPES n'a pas eu d'effet significatif sur le Ca2+. D'autre part, la préservation froide atténuait beaucoup la fréquence et l'intensité de la réponse des CES à l'agoniste ATP. Par ailleurs, une coloration des CES au Hoechst et à l'iodure de propidium démontrait des taux d'apoptose et de nécrose augmentant proportionnellement au temps de préservation. Les taux d'apoptose étaient plus importants que ceux de nécrose. Ainsi, les changements de composition des solutions de reperfusion ont un plus grand effet sur le Ca2+ des CES que les changements de température. Les temps de préservation hypothermique n'ont pas d'impacts importants sur le Ca2+, mais affectent une réponse à l'agoniste ATP, et induisent des taux d'apoptose et de nécrose augmentant graduellement.