Potentiel pharmacologique d'une nouvelle classe d'antisens dans l'application de la thérapie génique

Abstract

L'utilisation d'oligodésoxyribonucléotides antisens est un outil puissant pour réguler 1'expression génique et le développement de nouvelles structures représente un domaine en pleine effervescence en chimie médicinale. En effet, nous cherchons à développer des molécules dont l'affinité de liaison pour l'ARNm serait plus élevée, tout en possédant la capacité d'activer la RNase H, l'enzyme qui reconnaît le complexe ADN / ARNm et qui dégrade l'ARNm. Il a déjà été démontré qu'une inversion de configuration en position C2' du ribose de l'ADN (ANA), combinée à la substitution du groupement 2'OH par un atome fluor (2'F-ANA) augmente l'affinité de liaison de l'oligonucléotide à l'ARNm. Lors de notre étude, nous avons évalué l'activité antisens d'oligonucléotides phosphorothioates chimériques composés de 2'-désoxy-2'-fluoro-P-D-arabinose et de 2'-désoxyribose (chimère S-2'F-ANA / ADN) comportant un sucre en confonnation L à leur extrémité 3'. Nous avons déterminé la capacité de ces molécules à inhiber 1'expression et la phosphorylation de Flk-1, un récepteur du VEGF ainsi que les effets médiés par le VEGF, soit la prolifération, la migration et la synthèse du «platelet-activating factor» (PAF) au niveau des cellules endothéliales (CE). Le traitement de CE d'aorte bovine avec les chimères S-2'F-ANA / ADN a pennis de réduire l'expression protéique ainsi que la phosphorylation de Flk-1 plus efficacement qu'un traitement avec les antisens d'ADN phosphorothioates (S-DNA) utilisés comme témoins positifs. Par contre, ces deux classes d'antisens ont inhibé les effets biologiques du VEGF de la même manière. Cette étude démontre aussi la capacité des antisens chimériques à activer la RNase H et leur meilleure affinité de liaison envers l'ARN comparativement aux antisens S-DNA.