Détermination du rôle du domaine de liaison à la myosine de l’anilline durant la cytokinèse

Abstract

Au cours de la cytokinèse, qui se produit à la fin de la division cellulaire, un sillon de clivage se forme au milieu de la cellule et se contracte pour la diviser en deux. Bien que de multiples mécanismes responsables du positionnement des sillons semblent coexister, les modèles actuels suggèrent que l’ingression du sillon est guidée par l’assemblage et la contraction de filaments d’actomyosine qui s’organisent en un anneau contractile (AC), structure très dynamique dans laquelle les filaments sont assemblés et désassemblés en continu. Après sa fermeture, l’anneau contractile se transforme en une structure plus stable appelée l’anneau du midbody (AM) qui orchestre l’abscission. Pour réussir la cytokinèse, les filaments d’actomyosine sont assemblés sur un réseau de protéines cytosquelettiques au niveau du site de clivage qui agissent comme un échafaudage et relient les filaments d’actomyosine à la membrane cellulaire. Une des protéines qui jouent un rôle central dans l’organisation de cet échafaudage est l’anilline. L’anilline contient plusieurs domaines de liaison à différentes protéines, parmi eux, le domaine de liaison à la myosine. Ce dernier fait partie des domaines les moins étudiés de l’anilline et dont le rôle reste inconnu. Notre hypothèse est que ce domaine est nécessaire pour la rétention de l’anilline à l’AM durant sa maturation. Divers mutants du MyoBD ont été fusionnés à une protéine fluorescente et caractérisés par microscopie confocale. Nos résultats suggèrent que, malgré que l’anilline-MyoBD soit facultatif pour la cytokinèse, ce domaine s’avère être important pour la taille des AM produits et pour l’étape d’abscission subséquente.

During cytokinesis, which occurs at the end of cell division, a cleavage furrow forms in the middle of the cell and contracts to divide it in two. Although multiple mechanisms responsible for furrow positioning co-exist, current models suggest that furrow ingression is guided by the assembly and contraction of actomyosin filaments that organize into a contractile ring (CR), a highly dynamic structure in which filaments are continuously assembled and disassembled. After its closure, the CR transforms into a more stable structure called the midbody ring (MR) which orchestrates abscission. To achieve cytokinesis, actomyosin filaments are assembled on a network of cytoskeletal proteins at the cleavage site that act as a scaffold and connect the actomyosin filaments to the cell membrane. One of the proteins that play a central role in the organization of this scaffold is anillin. Anillin contains several protein-binding domains, among them the myosin-binding domain. The latter is one of the least studied domains of Anillin and its role remains unknown. Our hypothesis is that this domain is required for the retention of anillin at the midbody ring during its maturation. Various MyoBD mutants were fused to a fluorescent protein and characterized by confocal microscopy. Our results suggest that, although Anillin-MyoBD is dispensable for cytokinesis, this domain is shown to be important for the size of the MR produced and for the subsequent abscission step.