Candida species and inflammation mediators in denture stomatitis : detection in biological samples

Abstract

Introduction: La stomatite prothétique (SP) est une des conditions inflammatoires communes affectant la muqeuse du palais dur en contact avec une prothèse partielle ou complète. Les étiologiques les plus probable de la SP sont l’infection fongique, la présence de biofilm sur la prothèse, et les traumatismes.

Objectifs de notre étude: 1) détection des cytokines dans les échantillons congelés provenant de patients sains et affectés par la SP; 2) verification de la capacité de Candida albicans de croître sur des milieux sélectifs après une congelation prolongée; 3) évaluation de la relation entre Candida sp. et la SP; 4) evaluation de la prévalence de Streptococcus mutans chez les patients atteints ar la SP.

Méthode: Un total de 115 échantillons cliniques, conservés à -80°C depuis 2008 ont été utilisés pour cette étude. La présence de C. albicans et C. tropicalis, et S. mutans a été évaluée par PCR et par culture. Un ELISA en sandwich a été utilisé pour la détection et le dosage de l'IL-1β, IL-6 et le TNF. La présence de Candida sp. a été testé à l'aide de milieux de culture sélectifs pour tous les échantillons (n = 115) dans les 24 heures suivant le prélèvement et avant et après congélation 7 ans plus tard. Résultats: La culture microbiologique sur les échantillons frais de 2008 a démontré que C. albicans était présent dans 21.7% de tous les échantillons. Cependant, après décongélation, la détection de C. albicans ne peut être considérée comme fiable (4.35%). L’utilisation de la PCR nous a permi de détecter la presence de C. albicans, C. tropicalis, S. mutans dans SP, sauf chez les patients sains. C. tropicalis est toutefois plus frequents que C. albicans, un résultat qui contraste avec la culture lorsque l’échantillon était frais.

Conclusion: Ces résultats montrent que la conservation à long terme à -80°C altère la capacité de détecter les microorganismes par culture (80%) et par PCR. En outre, nous ne pouvions détecter les cytokines dans les échantillons. Cependant, une association entre Candida sp, S. mutans et SP est probable.

Introduction: Denture stomatitis (DS) is a common inflammatory condition affecting the hard palate of mucosal tissue in contact with complete or partial denture. The most likely etiological factors of DS are fungal infection, denture biofilm, and trauma. Objectives: 1) To investigate the ability of Candida sp. to grow in specific media after long term storage 2) To investigate the relationship of Candida sp. and denture stomatitis 3) To test the prevalence of S. mutans in DS patients 4) To detect the value of IL1-β ,IFN-γ ,IL-6, and TNF-α in samples after long term storage Method: A total of 115 clinical sonicate samples, taken from individuals over 63 years old, kept frozen at -80°C from 2008 were used for this study. The presence of C. albicans and C. tropicalis, and S. mutans was evaluated by PCR and culture. A sandwich ELISA was used for the detection and assay of IL-1β, IL6 and TNFα. Presence of Candida sp was tested by using specific media for all samples (n=115) within 24 hours of collection and before and after freezing 7 years later. Results: Microbiological cultures on fresh samples in 2008 showed that C. albicans was present in 21.74% of all samples. However, after thawing, detection of C. albicans cannot be considered reliable (4.35%). The use of PCR allowed us to detect the presence of C. albicans, C. tropicalis, S. mutans in DS, except in healthy patients. However, C. tropicalis is more frequent than C. albicans, a result that contrasts with the culture when the sample was fresh Conclusion: Our results show that the capacity to detect microbial cells by culture after long term storage at -80°C was decreased about 80%. In addition cytokines might be degraded, rinsed off or below our detection level. However, association between Candida sp., S. mutans and DS was found.