L’adénosine et CD73 dans le potentiel métastatique et le métabolisme cellulaire

Abstract

Introduction : CD73 est une protéine membranaire impliquée dans la génération de l‘adénosine extracellulaire. L’adénosine extracellulaire est connue pour exercer des fonctions diverses dans un contexte physiologique et pathologique. Dans un contexte tumoral, ceux-ci sont généralement liés à l’immunosuppression et la progression tumorale. Objectif : Démontrer un potentiel rôle de CD73 et de la signalisation de l’adénosine dans le phénotype mésenchymateux et évaluer l’impact de CD73 sur le métabolisme des cellules cancéreuses, principalement en ce qui concerne la phosphorylation oxydative. Méthodologie : Pour ce faire, principalement deux modèles cellulaires ont été employés, soit les HMLE-Twist-ER et les MDA-MB-231. L’expression de CD73 fut observée lors de la modulation de l’EMT. Ensuite, le retrait de CD73 a été effectué dans les cellules par CRISPR-Cas9 et des expériences se sont déroulées afin de déterminer si l’absence de CD73 influence le procédé de l’EMT. Un Micro Array a été effectué sur les MDA-MB-231 déficientes pour CD73, suivi par la mesure du métabolisme cellulaire par le SeaHorse analyzer. Résultats : Il semble y avoir modulation de l’expression de CD73 dans les cellules au phénotype mésenchymateux. Cependant, la présence de CD73 affecte peu les marqueurs de l’EMT dans les deux modèles employés. Or, l’absence de CD73 semble diminuer la consommation d’oxygène des cellules. Conclusion : Malgré le manque d’expériences pour affirmer des changements dans le phénotype cellulaire, CD73 semble avoir une expression plus élevée dans les cellules mésenchymateuses et les cellules cancéreuses n’exprimant plus CD73 ont une diminution de leur consommation d’oxygène. Ainsi, la confirmation de ces résultats pourrait apporter une nouvelle facette à CD73 dans un contexte tumoral et aider à mieux comprendre le micro-environnement tumoral.

Introduction: CD73 is a membrane bound protein implicated in the generation of extracellular adenosine. The adenosine is known to act in many aspects of health and disease, including cancer. In a tumor context, adenosine and CD73 are considered as immunosuppressive protumorigenic. Objectives: In this work, I tried to shed light on the possible role of CD73 in cancer metastasis, using the EMT model, as well as its possible implication in cancer metabolism, especially oxidative phosphorylation. Methodology: In this study two cellular models were primarily used, the HMLE-Twist-ER model and the MDA-MB-231 cell line. We examined the expression of CD73 upon stimulation or inhibition of the EMT. To see if CD73 had an impact on EMT, it was removed from cells with CRISPR-Cas9. EMT cell marker were assessed on both cell expressing or not CD73. A MicroArray was done on the MDA-MB-231 cells deficient for CD73. The cellular metabolism was also measured on those cells with the Seahorse analyzer. Results: Expression of CD73 seemed higher in cells with a mesenchymal phenotype, even though the absence of CD73 didn’t seem to affect EMT marker in the cellular models used. On the other hand, CD73 deficient cells had a lower rate of oxygen consumption compared to their control. Conclusion: Even with the lack of results to confirm a phenotype change, some interesting observation have been made, such as what seems like an higher expression of CD73 in mesenchymal cells and a lower oxygen consumption rate in cell lacking CD73 expression. If confirmed, these results could give us more insight into CD73’s function and his impact on tumor microenvironment.