Rôle des modulateurs de la protéine kinase D dans la propagation du virus herpès simplex de type 1

Abstract

Le virus herpès simplex de type 1 affecte la population mondiale en entraînant des lésions bénignes comme les feux sauvages, mais aussi des complications sévères telles que la cécité. Les traitements actuels ne permettent toutefois pas d’éradiquer ce virus, car ce dernier a notamment un rapide et complexe cycle de vie. Les acteurs moléculaires impliqués dans les différentes étapes du cycle viral sont encore peu connus, mais le laboratoire a précédemment démontré l’implication de la protéine kinase D de l’hôte et du diacylglycérol, sa principale molécule d’ancrage, dans la sortie du virus du réseau trans-Golgien vers la membrane plasmique. Ce projet de maîtrise va plus loin en étudiant le rôle des différents modulateurs de la protéine kinase D dans la propagation virale. Suite à des expériences d’ARN d’interférence, de surexpression et l’utilisation de drogue, les résultats démontrent que, contrairement à la protéine kinase D, plusieurs de ses modulateurs comme CERT, GGA1 et Nir2 régulent négativement la relâche extracellulaire du virus. Ces effets seraient d’ailleurs indépendants des niveaux intracellulaires totaux de diacylglycérol. La microscopie électronique suggère enfin que la protéine kinase D et Nir2 ne jouent pas seulement un rôle au niveau du réseau trans-Golgien, mais affectent également d’autres étapes de la propagation virale comme la sortie nucléaire. Au final, ces résultats contribuent à une meilleure compréhension du transport du virus herpès simplex de type 1 et de ses interactions avec la cellule hôte. Ces nouvelles données pourraient éventuellement mener au développement de nouveaux traitements, puisqu’elles peuvent s’appliquer à d’autres virus ou aux larges cargos cellulaires.

Herpes simplex virus type 1 affects the world's population by causing benign lesions such as cold sores, but also severe complications such as blindness. However, current treatments do not eradicate this virus, because the latter has a fast and complex life cycle. The molecular actors involved in the various stages of the viral cycle are still little known, but the laboratory has previously demonstrated the involvement of the host protein kinase D and diacylglycerol, its main anchoring molecule, in the release of the virus from the trans-Golgi network to the plasma membrane. This project goes further by studying the role of different modulators of protein kinase D in viral propagation. Following RNA interference, overexpression and drug experiments, the results demonstrate that, unlike protein kinase D, several of its modulators such as CERT, GGA1 and Nir2 negatively regulate the extracellular release of the virus. These effects are, moreover, independent of the total intracellular levels of diacylglycerol. Finally, electron microscopy suggests that protein kinase D and Nir2 do not only play a role in the trans-Golgi network, but also affect other steps of viral propagation such as nuclear release. These results contribute to a better understanding of the transport of herpes simplex virus type 1 and its interactions with the host cell. These new data could eventually lead to the development of new treatments, since they can be applied to other viruses or large cellular cargos.